斑马鱼:研究肾功能与疾病的动物模型 – 实验动物

摘要:脾气呕吐是独一整体的的成绩。。,仅在英国,就有大概三百万人被诊断。,抨击复活。。调查和上坡上进的治愈方法是至关要紧的。。小动物性格有助于上进地知病理生理机制。,制剂治愈复合词。,只是,尤其地,哺乳小动物性格的应用被期望被对作最低评价。,脱下小动物福利。斑马鱼越来越多地被应用,鉴于它具有小球滤清和TU的根本脾气切开体系。。在这边,我们家将议论斑马鱼健康状况如何助长脾气病和脾气呕吐机制的调查。

关键词:脾气 斑马鱼 慢性脾气呕吐 多囊性肾病  敏感的肾损毁  小动物性格  脾气呕吐

简介:脾气呕吐是独一整体的的成绩。。,仅在英国,就有大概三百万人被诊断。,但仍有精彩的人未被诊断。。动植物油、中消、过度紧张等纠纷在肾功用失败中起必然功用。只是必要更多的调查来知DIS向后的病理生理机能。。小动物调查是调查的次要器。,上进地知正规的的生理和呕吐机制。,并受测验潜在的治愈方法。。斑马鱼已被创建作为增大和繁衍调查的性格。只是,技术的先进助长了斑马鱼作为调查器官特征呕吐(如脾气呕吐)性格的开展。斑马鱼胚胎在增大的前期阶段(受精后5天)被以为缺少什么苦楚,去,不受小动物试验委托书的警卫。,依据使它们套装哺乳小动物性格如MIC的有效的险胜性格。。斑马鱼鲸蜡油也可以冷冻用的保持不变,缩减体内培育的必要,依据缩减了资源的应用。。斑马鱼比哺乳小动物性格(如mouse的复数形式)具有优势。能发生浓厚的的(50-200)后代。,并在3个月内长到成丁。。这使得对各式各样的复合词举行受测验。,使相等药物制剂也可加工的的。,潜在高通量。鉴于传送,这些胚胎可以被紧紧地地剖析为一种感兴趣的表型,经过两人间的关系处置和漂白菌株可以缩减涂剂。,去晚上用的的表型剖析是能够的。。鉴于它们例外的套装遗传处理或负责。,比如,在性命的细胞阶段,DNA和RNA被微傲慢无礼的年轻人。,调查遗传性呕吐。。人类和斑马鱼加里暗击中要害功用域具有很高的守旧性,反正70%的斑马鱼加里同人类同式发育。久斑马鱼被用于另外调查担任守队队员,上进地知各式各样的呕吐的保持健康。。比如,应用两人间的关系品,它可以开说很好的东西器官的精髓。,这些性格被颁发专业合格证书在社会恶习性格中是有效的。。

斑马鱼性格的概略:正向和反向遗传方法可以一言可尽地用于斑马鱼情报调查。阳性的遗传方法关涉胚胎的随机打破。,情报功用的使变换,Phenotype是寻觅罹病性情报的原点。。斑马鱼的制剂是可加工的的,第独一用于评议脊椎小动物增大的情报。他们也成交托出人类呕吐的候选情报。与反向遗传论相反,这是无偏无党的方法。,独一假设的的情报被拆除以调查胚胎的情感。。这边描述方法了可以用于斑马鱼的各式各样的遗传处理或负责的摘要:

即溶饮料情报减少:吗啉代  另独一器是吗啉代这些目的反义寡核糖酸都是自20世纪90年头以后经用的碱基装饰寡核糖酸,即溶饮料敲除感兴趣的斑马鱼情报。在2000年第一流的用于斑马鱼,特征阻断mRNA混频物的优点。,能力高尚的。它们是第一种调查假设的情报或多个情报的方法。。

正向遗传:  随机打破,拔出解体发生。

反向遗传 : 目的开说的情报组慢车异常状态,目的情报打破。

斑马鱼脾气与哺乳小动物脾气:斑马鱼是一种淡水鱼,斑马鱼脾气的次要功用是排泄水和饲料渗透压力监听。不过,斑马鱼与哺乳小动物脾气暗中必须紧密的功用使有效物性,这使斑马鱼套装脾气调查的极好性格。斑马鱼能够是独一调查如小球滤清和肾小管清零转换的有效有机体系。斑马鱼前肾是由两个肾单位可追踪的中胚叶,使有效地哺乳小动物脾气。原始肾小管的安博与小球I贯。。最早的肾小管由小球上皮行列而成。,使有效物哺乳小动物体系,肾小管近端和远端。在哺乳小动物脾气中定状态假设的节段的很好的东西情报也在斑马鱼中表达。比如,溶解物转学SLC9A3和SLC4A4被限度局限在斑马鱼和哺乳小动物近端表达和clcnk编码哺乳小动物击中要害氯离子胡同在远端区域表达。像人类同上,斑马鱼具有发展的先开后合,巨加里和CuBLN接受器也状态近端小管节段。,食盐好、糖和小加里的再吸取。斑马鱼的小球切开体系与人小球使有效,另独一分别是,斑马鱼有中肾而缺点成材的后肾,无膀胱。再一次,与哺乳小动物肾体系轻微地差额。,比如,缺少近端直小管和升支。。

脾气增大:脾气增大有使有效之处。:斑马鱼的情报如(高高的脊椎小动物脾气增大不可缺少的)也训练肾增大而造成是你这么说的嘛!有管状小花的粉碎。斑马鱼加里cadherin17,同式发育人类Li cadherin(CDH17),保证书根尖和地下室膜体系域和D的增大。Notch用枪打猎干线已被证明在精髓中起要紧功用。,如Deltac,jag1b和jag2a,少量地中胚叶。肾前异常状态的朝向与粉碎,筹集胚胎轴情感维甲酸迅速的,话说回来整队。维甲酸与Irx3b用枪打猎干线的调查,斑马鱼出价了独一洞察肾单位求导数的窗口。吗啉代敲除受精后72h斑马鱼胚胎irx3b情报显示独一老年的远端的缺少此外近端小管局限于扩张和贿余。风趣的是,相对于人类,斑马鱼还能上坡新的肾单位,应对肾伤害。经过调查斑马鱼肾增大,调查人员可以检测肾功用的分子干线。,它可以在mouse的复数形式性格中更远的调查。。很好的东西斑马鱼打破株今日存相信生物医学调查中,肾功用的调查,奏效与人的脾气涉及。。比如,TG斑马鱼线,绿色荧光性P对近端肾小管和小球的目测调查,用于显示的肾母细胞瘤加里(WT1)在斑马鱼小球整队和上坡转换击中要害基本性。WT1情报打破可造成肾母细胞瘤。、儿童肾癌。

肾功用的功用反省:不动的另外的器可以用来调查肾功用。。思索肾排泄水的基本性,打破鱼贿余能够是肾功用受损的打手势。。斑马鱼性格通常很难检测尿液击中要害找头,为了评价假设的的徽章物的去除,鉴于水环境A,尿液不纯洁。。统治肾功用反省在临床还愿中具有挑战性。,鉴于尿量很小。,尿液会被救援物资到四周的海域。。这可以限度局限斑马鱼作为假设的有管状小花的呕吐性格的功效。荧光性剖析在调查斑马鱼肾功用和呕吐性格军事]野战的是有效的。通常,在斑马鱼胚胎中注射剂荧光性追踪者,在荧光性显微镜下一言可尽追踪到它们。。高分子追踪者保存使嫁成为整体的小球屏蔽,去可用于小球功用的调查。。转情报株系表达维生素P,柠檬素D嫁绿色荧光性。与另独一足细胞损毁的转情报株系杂交繁育,双转情报鱼显示VDBP GFP在近端小管击中要害整理。,显示小球滤清屏蔽受损(GFB)。低式量荧光性追踪者的溶解率可以是我们家。。这种技术可以片面地应用斑马鱼胚胎和脾气,看得见的荧光性显微镜如愿以偿。。受损的小球滤清功用将造成鱼肉失水葡萄糖保存。,它可以被目测和测。。肾清零打手势物Luo Danming dextran为10分子WI。 kDa,当注射剂胎儿围心时。鱼肉的荧光性耽搁与失水葡萄糖肾澄清率涉及。。追踪者也可用于评价肾小管功用。,尤其地近端小管发送气音功用。。斑马鱼肾小管功用的另独一要紧军事]野战的是水的排泄。去,肾小管转学加里错过造成水潴留,不少于我们家在是你这么说的嘛!诉讼中所示,原始肾小管的扩张。。

斑马鱼作为小球呕吐性格:在调查中,两个候选加里,SOS RAS /鸟咖啡碱核糖酸交易所遗传因子2(SOS2)和酸性磷酸酶1(ACPI),被预测要关涉的前期脾气的增大和功用的根据评价小球滤清率(eGFR),血浆肌酐和打破情报。稀有解体对慢性脾气呕吐情感的评价。白面儿在斑马鱼胚胎击中要害傲慢无礼的年轻人,肾小管典范的找头,但愿狭长、胚胎体长缩减。以确保这些找头缺点由批评形成的。,指画”ATG的吗啉代的接收位点与叠化剪辑位点的吗啉代认可也直接行动使有效物的表型,体长缩减。72h胚胎也涌现贿余。,应用70 KDA罗丹尼对小球功用和肾小管血流的了结,与对照组比拟,失水葡萄糖清零率使跌价。。这种表型也与SOS2涉及。、ACP1染指脾气增大。。磷脂酶C epilson打破情报(plce1),它的正规的功用是启动细胞上坡。、求导数与情报表达,造成早发型肾病综合征和终终相肾病。斑马鱼plce1加里高处守旧,调查者可实用的地根究PLCE1在足细胞击中要害功用。。

敏感的肾损毁:斑马鱼也被用来调查肾毒性药物如顺铂、Gentamicin效应。这些药物的应用会造成胚胎贿余。,显微解剖学使变换。,比如,牙刷边的的公寓化和管腔内的碎屑。。最要紧的是,在这些药物治愈的斑马鱼体内傲慢无礼的年轻人追踪者,如失水葡萄糖和菊糖,小球滤清率受到背景幕布。,清零率在下面对照组。。E3泛素连接酶,mouse的复数形式双微体情报,p53开说的监听,它是发火的助长剂。。饲料肾小管上皮的抵消也很要紧。。MDM2减少剂眼前被用作抗癌药物。,托马索娃以及其他人近亲的一调查。。对肾小管上皮有警卫功用。,对敏感的肾损毁具有警卫功用。。

肾小管功用:虽然斑马鱼在有管状小花的呕吐的调查中有局限,但它们也被用于调查肾小管中间定位呕吐。。多囊肾呕吐:评议了12个具有囊性脾气表型的斑马鱼打破罹病性情报,12个情报同式发育情报,肝细胞核遗传因子1(HNF1)与多囊肾病2(PKD2)AR。多囊加里打破(PC),多囊肾病1和2(PKD1和PKD2),它造成人类常染色体显性多囊肾病。 囊肿整队包含两个手段。, 上皮PKD的Germline打破和肉体打破,开说了这些细胞的产生。,并整队囊肿和有管状小花的扩张。。经过注射剂外源情报或DNA,斑马鱼胚胎中过表达C-底部的多囊加里节片,它显示了肌肉和原始肾小管团体的拆除。。调查弄清,多囊加里1监听Wnt用枪打猎干线,肾小管增大的爱挑剔的期。斑马鱼也出价了在Nek家族致活酶打破的跨物种警卫,mouse的复数形式与皮质集中端囊肿整队的认为。NEK8与多囊肾病中间定位。应用吗啉的方法在斑马鱼胚胎中傲慢无礼的年轻人NEK8反义序列造成受精后48h斑马鱼涌现囊性脾气。

终终相肾病与载脂加里1:载脂加里1(APOL1)的打破已被颁发专业合格证书能能筹集开展为终终相肾病(ESRD)的风险。肾再生:斑马鱼也被用来调查功用丧权辱国后再生的能够性。奏效弄清:,肾祖细胞能在成丁斑马鱼发生新的肾单位。再一次,使用TC转情报株系、TG,调查人员能追踪G后脾气再生的时期。。表达WT1情报的同式发育情报,wt1b,情感肾损毁4天的成丁斑马鱼,1个肾单位芽基新的前期祖细胞的增大。

意见:我们家可以使用斑马鱼来调查靶情报打破对脾气生理功用的情感,鉴于遗传使有效物性,我们家使用这些知帮忙我们家知。目的种系打破,我们家也可以评价假设的打破的情感。,评价肾病能容忍的遗传解体的罹病性性。。斑马鱼也可以用来调查脾气的根本生理。通常,斑马鱼是调查肾功用和呕吐的独一有效的性格。

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